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              產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

              唾液RNA提取試劑盒(中量)

              簡(jiǎn)要描述:

              唾液RNA提取試劑盒(中量)公司正在出售的產(chǎn)品:人卵巢癌耐DDP細(xì)胞,2mmol/L SBDN蛋白封閉多肽 睡眠嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 大鼠乙醇脫氫(ADH)試劑盒 ELISA 脂肪合成(FAS)活性比色法檢測(cè)試劑盒 束狀葡柄霉 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框185抗體

              更新時(shí)間:2024-01-15

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              唾液RNA提取試劑盒(中量)

              商品屬性:

              產(chǎn)品名稱

              規(guī)格

              貨號(hào)

              唾液RNA提取試劑盒(中量)

              50T

              A-Tq3065

              唾液RNA提取試劑盒(中量)

              100T

              A-Tq3065

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              PCR 反應(yīng)需要使用哪些試劑和設(shè)備?

              試劑:
              模板DNA:PCR反應(yīng)需要模板DNA,如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等;引物:PCR反應(yīng)的兩個(gè)引物,分別與模板DNA的兩端配對(duì)擴(kuò)增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過(guò)程中使用到的引物;dNTPs:PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細(xì)胞分裂、DNA合成等生物學(xué)過(guò)程,用于PCR擴(kuò)增的模板DNA鏈的延伸和擴(kuò)增;Taq DNA聚合酶:PCR反應(yīng)需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴(kuò)增DNA鏈;PCR buffer溶液:對(duì)PCR反應(yīng)具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應(yīng)pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機(jī)化合物如甲醛,可增強(qiáng)PCR反應(yīng)特異性,從而提高反應(yīng)效率;酶切體系:PCR擴(kuò)增往往涉及到重組、構(gòu)建和測(cè)序等等實(shí)驗(yàn)步驟,常常需要進(jìn)行酶切操作。MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn),用來(lái)判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物;
              設(shè)備:
              PCR儀:用于控制反應(yīng)溫度,保證PCR反應(yīng)時(shí)不同溫度環(huán)節(jié)的嚴(yán)格控制;電泳槽:用于分離PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;核酸提取儀:從組織樣本中全自動(dòng)提取核酸。  這些試劑和設(shè)備在PCR分子生物學(xué)技術(shù)中均是,只有在有序齊全的基礎(chǔ)上,才能進(jìn)行PCR反應(yīng)并得出準(zhǔn)確結(jié)果。

              PCR相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn):

              PCR反應(yīng)基本步驟一般的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)由20到35個(gè)循環(huán)組成,每個(gè)循環(huán)包括以下3個(gè)步驟:

              一、變性:

              利用高溫(93-98℃)使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個(gè)循環(huán)之前,通常加熱長(zhǎng)一些時(shí)間以確保模板和引物分離,僅以單鏈形式存在。該步驟時(shí)間1-2分鐘,接下來(lái)PCR儀就控制溫度進(jìn)入循環(huán)階段。

              二、退火或稱接合,復(fù)性:

              在DNA雙鏈分離后,降低溫度使得引物可以結(jié)合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點(diǎn)5℃。錯(cuò)誤的退火溫度可能導(dǎo)致引物不與模板結(jié)合或者錯(cuò)誤地結(jié)合。該步驟時(shí)間1-2分鐘。

              三、延伸:

              DNA聚合酶由降溫時(shí)結(jié)合上的引物開(kāi)始沿著DNA鏈合成互補(bǔ)鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時(shí)間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長(zhǎng)度。傳統(tǒng)的Taq估計(jì)合成1000bp/min、較新的Tbr(來(lái)自于嗜熱菌Thermus brockianus)約40秒、商業(yè)公司生產(chǎn)的融合型聚合酶僅需約10-15秒。

              PCR反應(yīng)條件優(yōu)化:

              1、變性溫度和時(shí)間:

              保證模板DNA解鏈?zhǔn)潜WC整個(gè)PCR擴(kuò)增成功的關(guān)鍵。加熱90~95°C, 30~60s,再?gòu)?fù)雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過(guò)高或高溫持續(xù)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),可對(duì)Taq酶活性和dNTP分子造成損害。

              2、復(fù)性溫度和時(shí)間:

              PCR擴(kuò)增特異性取決于復(fù)性過(guò)程中引物與模板的結(jié)合。復(fù)性溫度越高,產(chǎn)物特異性越高。復(fù)性溫度越低,產(chǎn)物特異性越低。需根據(jù)引物的Tm值具體設(shè)定。

              3、延伸溫度和時(shí)間:

              一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個(gè)核苷酸時(shí),過(guò)高的延伸溫度不利于引物與模板的結(jié)合,可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應(yīng)時(shí)間,可根據(jù)待擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度而定,小于1kb, 1min足夠;大于1kb需加長(zhǎng)延伸時(shí)間。Taq酶可根據(jù)1kb/min增加時(shí)間。這里需要注意,延伸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能出現(xiàn)非特異擴(kuò)增。因此需要設(shè)置恰到好處的延伸時(shí)間。

              4、循環(huán)數(shù):

              其他參數(shù)選定后,PCR循環(huán)次數(shù)主要取決于模板DNA的濃度。理論上說(shuō)20?25次循環(huán)后,PCR產(chǎn)物的積累即可達(dá)到最大值,實(shí)際操作中由于每步反應(yīng)的產(chǎn)率不可能達(dá)到100%,因此不管模板濃度是多少,20~30次是比較合理的循環(huán)次數(shù)。循環(huán)次數(shù)越多,非特異擴(kuò)增增加。

              公司正在出售的產(chǎn)品:

              鏈球菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒

              G蛋白偶聯(lián)受體152ELISA試劑盒 GPR152/PGR5免費(fèi)代測(cè)試劑

              中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞基因組DNA殘留探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒(不含內(nèi)參)

              口蹄疫病毒2亞型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)

              多萜醇磷-N-乙酰氨基葡萄糖磷轉(zhuǎn)移1ELISA試劑盒 DPAGT1免費(fèi)代測(cè)試劑

              x綿羊星狀病毒1PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)

              ACTB基因PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

              橋粒芯糖蛋白-1ELISA試劑盒

              鯉春病毒血癥病毒PCR檢測(cè)試劑盒

              人乳頭瘤病毒16

              二甲基甘氨脫氫ELISA試劑盒

              里氏立克次氏體染料法熒光定量PCR試劑盒

              腦多頭囊蟲染料法熒光定量PCR試劑盒

              芳犬尿氨甲酰胺ELISA試劑盒

              禽痘病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

              牛病毒性腹瀉病毒2型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

              防御β135ELISA試劑盒

              促生長(zhǎng)轉(zhuǎn)ScGH基因成分核檢測(cè)試劑盒

              牛布魯氏桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

              分揀連接蛋白17ELISA試劑盒

              饒氏無(wú)綠藻染料法熒光定量PCR試劑盒

              腦膜炎奈瑟菌PCR檢測(cè)試劑盒

              封閉蛋白17ELISA試劑盒

              卡他莫拉菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格

              腦膜炎奈瑟菌W(NM-W)核檢測(cè)試劑盒

              鈣蛋白13ELISA試劑盒

              禽沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)

              牛腸道病毒PCR檢測(cè)試劑盒

              甘丙肽受體4ELISA試劑盒

              里氏立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒

              馬皰疹病毒1PCR檢測(cè)試劑盒直銷

              人白介前體(pro-IL1B)試劑盒ELISA

              犬細(xì)小病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

              美人魚發(fā)光桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

              人纖維蛋白(Fibrin)elisa試劑盒

              小薊染料法PCR鑒定試劑盒

              費(fèi)蘭杜病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒

              Stathmin 1(STMN1)ELISA檢測(cè)試劑盒

              猴病毒40探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

              東方蜜蜂微孢子蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

              人白細(xì)胞酯(LE)試劑盒ELISA

              唾液RNA提取試劑盒(中量)豬嗜血桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

              禽致病性大腸桿菌1血清型探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

              人丁酰酯(BCHE)試劑盒ELISA

              E-選擇S128R基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒(PCR-RLFP)

               


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